移液管PK移液器第二彈！實(shí)驗(yàn)告訴你哪個(gè)更
首先，我們要知道移液管與移液器按照各自的計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（JJG 196與JJG 646）標(biāo)定（校準(zhǔn)）的方法是*一樣的，即使用稱重法對(duì)移液體積進(jìn)行標(biāo)定。
標(biāo)定的操作大致描述如下：
1、在恒溫恒濕環(huán)境下，將稱量容器在分析天平上去皮；2、吸取標(biāo)稱量程（即*大量程）的蒸餾水，注入稱量容器稱重得到排出蒸餾水的重量Δm；3、 在對(duì)應(yīng)水溫下將蒸餾水的重量Δm使用水的Kt值換算成體積，即V=Kt*Δm。Kt值的公式可以查看相應(yīng)的計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)。從公式中可以知道Kt值的主要影響因素為水的密度。
其次，從測(cè)量方法上來看，移液管與移液器標(biāo)定體積的方式幾乎是*一樣的，如果標(biāo)稱精度一致，真實(shí)操作蒸餾水以外的液體時(shí)精度表現(xiàn)是否*一致呢？答案是否定的。為了理解這一點(diǎn)我們需要知道移液管和移液器的結(jié)構(gòu)與吸液原理的差異。
移液管（左）與移液器（右）的定體積原理的差異
移液管為簡(jiǎn)單的物理結(jié)構(gòu)，一般為玻璃材質(zhì)，以刻度確定體積。標(biāo)定對(duì)應(yīng)體積的對(duì)應(yīng)刻度時(shí)，采取的方法即上述校準(zhǔn)方法，對(duì)應(yīng)體積的蒸餾水對(duì)應(yīng)的質(zhì)量是一定的，那么如果吸液后排出的蒸餾水的質(zhì)量是“正確的“，代表吸液后排出蒸餾水的體積是”正確的（達(dá)到了標(biāo)稱值所允許的誤差范圍以內(nèi)）“，那么吸液時(shí)蒸餾水所在凹液面的*低點(diǎn)所代表的吸液體積是”正確的“，這個(gè)點(diǎn)也就是相應(yīng)體積的刻度所在。一旦這個(gè)點(diǎn)確定了，就物理地確定了移液管內(nèi)部的容積，這個(gè)容積之后幾乎不隨外部因素，比如液體密度，氣壓等因素變化而變化。
通常意義上的移液器為空氣活塞式移液器，當(dāng)移動(dòng)移液按鈕時(shí)，內(nèi)部的活塞位置發(fā)生變化，進(jìn)而產(chǎn)生負(fù)壓，從而將液體吸入吸頭內(nèi)。吸液體積的確定是由內(nèi)外壓差和一系列其他的因素決定的，但是主要決定因素是內(nèi)外壓差。當(dāng)標(biāo)定時(shí)，如果吸取的蒸餾水排出后的質(zhì)量是“正確的“（稱重法），代表吸液后排出的蒸餾水的體積是“正確的（達(dá)到了標(biāo)稱值所允許的誤差范圍以內(nèi)）”，那么代表了吸液的體積是“正確的”。因此，用蒸餾水確定了一把移液器的移液體積時(shí)，實(shí)際確定的是移液器內(nèi)外壓差以及一系列其他因素的綜合作用正好能夠吸取正確體積的蒸餾水。
這時(shí)，就很好理解，移液器在吸取不同類型液體，以及在不同環(huán)境條件下時(shí)，表現(xiàn)會(huì)有明顯的不同。比如當(dāng)環(huán)境條件沒有變化，即壓差是恒定的情況下，如果液體的密度不同于蒸餾水，即同等體積液體的質(zhì)量不同于蒸餾水時(shí)，為了平衡內(nèi)外壓力，必然吸液的體積會(huì)有所不同。我們舉個(gè)不太嚴(yán)謹(jǐn)?shù)睦踝觼眚?yàn)證這一點(diǎn)?？匆幌陆Y(jié)果如何？
實(shí)驗(yàn)部分
1、儀器與試劑（1）儀器
使用10 mL刻度移液管一支；
10 mL移液器一支；
HandStep? Touch電子連續(xù)分液器一支；
移取75%的乙醇排至同一個(gè)10 mL A級(jí)容量瓶。
注：所有儀器均來自于德國(guó)BRAND，如圖1所示。
圖1 從左至右分別為BLAUBRAND?刻度移液管（左一），Transferpette? S移液器（左二），HandStep? Touch電子連續(xù)分液器（右二），BLAUBRAND?容量瓶（右一）
（2）試劑
75% 乙醇。
2、實(shí)驗(yàn)步驟
步驟一、為了減少乙醇蒸發(fā)對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，制造合適實(shí)驗(yàn)環(huán)境。
我們把整個(gè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境用塑料臺(tái)布罩住，如圖2所示，并將75%乙醇倒在燒杯中置于測(cè)試環(huán)境超過2個(gè)小時(shí)以盡可能飽和環(huán)境中乙醇的分壓，降低操作時(shí)乙醇的蒸發(fā)速率。
圖2 實(shí)驗(yàn)環(huán)境
步驟二，對(duì)比用移液管（左）和移液器（右）分別吸取10 mL 75% 乙醇排入同一個(gè)容量瓶，如圖3所示。從圖3可以看出，在相同條件下，吸取10 mL 75%乙醇排入同一個(gè)容量瓶，移液器比移液管明顯多一些。我們知道乙醇的密度低于蒸餾水，即乙醇比水輕。因此在移液器內(nèi)外壓差一定的情況下，吸取乙醇的體積會(huì)比吸取水的體積更多。而移液管標(biāo)定時(shí)直接標(biāo)記的就是體積，因此，移液管吸取乙醇并排出之后的體積相比水的差異非常之少。排入容量瓶之后的結(jié)果驗(yàn)證了這一點(diǎn)。當(dāng)然，由于乙醇的高揮發(fā)性，以及其他影響移液器吸液的因素存在，乙醇相比水的密度差異并不是*按比例體現(xiàn)在移取體積差異上。
圖3 用移液管（左）和移液器（右）分別吸取的10 ml 乙醇結(jié)果對(duì)比
從上面的分析和實(shí)例來看，移液管確定體積的原理更直接，因此一般來說在相同標(biāo)稱精度之下，移液管相對(duì)移液器會(huì)有更優(yōu)的實(shí)際移液精度表現(xiàn)。當(dāng)然，影響移液管和移液器移液精度的因素有很多，我們并不能一概而論地說在任何情況下對(duì)于任何液體，標(biāo)稱精度相同的移液管實(shí)際移液精度表現(xiàn)都優(yōu)于移液器。
我們上面比較的移液器為實(shí)驗(yàn)室*常見的空氣活塞式移液器。然而，還有另外一種移液器類別——外置活塞移液器。從吸液排液原理上來說，外置活塞移液器在移取高揮發(fā)，高粘度的液體時(shí)，表現(xiàn)會(huì)優(yōu)于空氣活塞式移液器。我們?cè)谶M(jìn)行本次比對(duì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，結(jié)合移液管與空氣活塞式移液器的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也使用了外置活塞原理的HandyStep Touch的移液模式做了一個(gè)比對(duì)。
步驟三、HandyStep Touch配合10 mL PD吸頭吸取10 mL 75% 乙醇排入一個(gè)10 mL A 級(jí)容量瓶，結(jié)果如圖4所示。
圖4 使用HandyStep Touch配合10 mL PD吸頭移取10 mL 乙醇結(jié)果
結(jié)果表明，精度表現(xiàn)優(yōu)于同量程的空氣活塞式移液器。 誠(chéng)然，移液器的量取范圍更小，移液器的使用更為便捷，移液器的移液方式也更易于掌握，但是不可忽視的是移液器不論在精度定義還是在實(shí)際工作表現(xiàn)中，都不能*與移液管相提并論。當(dāng)然，提高移液器移液精度還有很多辦法，比如使用低吸附吸頭，比如就不同液體對(duì)于移液器進(jìn)行再校準(zhǔn)，比如使用外置活塞移液器。但是，總體而言，移液器的優(yōu)勢(shì)更多地體現(xiàn)在方便性與更小的量取范圍上。
在實(shí)際工作中，應(yīng)該根據(jù)實(shí)際的工作需要來決定使用移液管還是移液器進(jìn)行液體的量取，如果是精度不能妥協(xié)的實(shí)驗(yàn)，恐怕移液管，尤其是胖肚移液管是不二之選，反之，實(shí)驗(yàn)速度與效率如果是優(yōu)先考慮的要素，則移液器當(dāng)仁不讓。
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